Recommandations pour diagnostic de lèpre

Feuille de renseignements confidentiels accompagnant une biopsie cutanée de malade suspect de lèpre multibacillaire => cliquer ici

Indications de la recherche de Mycobacterium leprae
– Suspicion d’un nouveau cas de lèpre devant des signes cliniques (cutanés, neurologiques) ou histologiques => indiquer « Nouveau cas »
– Signes cliniques de lèpre évolutifs chez un patient ayant déjà été traité par antilèpreux => Indiquer « Rechute »

Remarque : il n’est pas recommandé de faire systématiquement un suivi microbiologique au cours du traitement. Néanmoins, en cas de perte de vue du patient ou de non compliance, il est possible de faire un contrôle sous traitement => indiquer « suivi sous traitement »

Nature du prélèvement
– La biopsie cutanée (biopsie punch de 3 ou 4 mm) d’une lésion est l’examen le plus fiable pour l’examen microbiologique. Si besoin, plusieurs lésions peuvent être prélevées
– En cas de rechute, une biopsie cutanée prélevée au scalpel (6mm) peut être plus informative
– Des frottis dermiques des lobes d’oreille peuvent être faits si la
technique est maîtrisée par l’opérateur. Les frottis sont étalés sur lames propres avec indication du nom du patient, date et site du prélèvement. Le suc dermique peut aussi être dilué dans 0,5 ml d’éthanol 70% (0,35 ml ethanol absolu +0,15 ml eau stérile distillée PPI)
– Prélèvement de mucus nasal sur écouvillon (type eSwab) : seulement en accord avec le CNR
– Détection des anticorps anti-PGL-1 sur sang EDTA, seulement en accord avec le CNR
Remarque : les prélèvements de mouchage nasal ne peuvent être étudiés

Il est indispensable d’indiquer le site du prélèvements la carte dermatologique de la feuille de demande.

TRANSPORT vers le CNR-MyRMA, Laboratoire associé (Bichat)
– Les prélèvements sont à mettre dans un tube sec stérile sans ajout et sans compresse
– Transporter dans un emballage adéquat pour prélèvements biologiques (B, UN)
– Un transport à température ambiante est suffisant dans la majorité des cas, sauf indication particulière ADN par exemple) décidée avec le CNR. Si besoin, le prélèvement peut être inactivé après 30 minutes à 95°C.

Adresse d’envoi

EXAMENS faits au CNR
1. Examen microscopique après coloration de Ziehl-Neelsen
Sur lames ou après broyage de la biopsie dans 2ml Hanks
2. Amplification par PCR en temps réel de la séquence RLEP, régions spécifiques de M. leprae répétées dans le génome (d’après Woods et Cole 1989 et Truman et al. 2018)
3. Test moléculaire de détection de la résistance aux anti-lépreux
Kit Genotype lepraeDR (Hain, Biocentric, Bruker) Cambau et al. Plos Neglected Tropical Diseases 2012 : 6(7) : 1-7
+ PCR-séquence des gènes rpoB, folP1 et gyr A, si besoin en complément

INTERPRETATION des examens
Résultats négatifs : l’absence de détection de Mycobacterium leprae par les tests microbiologiques n’infirme pas le diagnostic de lèpre, en particulier dans les formes pauci-bacillaires, tuberculoïde et neurologiques pures. Le diagnostic est d’abord clinique et basé sur des arguments épidémiologiques (pays endémique, contact autour d’un cas). 

Résultats positifs : l’examen microscopique positif et/ou une PCR RLEP positive confirment la présence de Mycobacterium leprae et le diagnostic de lèpre.

Le test GenoType Leprae DR confirme la présence d’ADN de M. leprae et peut conclure à :

•  une souche normalement sensible aux antilépreux (gènes rpoB, folP et gyrA sans mutations connues pour donner une résistance).
•  une souche résistante à la dapsone en cas de mutations folP (P55L ou autres mutations suspectées par l’absence des bandes sauvages et déterminées par PCR-séquençage)
•  une souche résistante à la rifampicine en cas de mutations rpoB (S456L, H451Y ou autres mutations suspectées par l’absence des bandes sauvages et déterminées par PCR-séquençage)
• une souche résistante à l’ofloxacine en cas de mutations gyrA (A91V suspectées par l’absence des bandes sauvages et déterminées par PCR-séquençage).

Télécharger ces recommandations ici

REUNION DE CONCERTATION PLURIDISCIPLINAIRE (RCP)
Les cas peuvent être discutés en RCP-lèpre le lundi à 16h une fois par mois.
Voir dates sur la page spécifique du site du CNR et sur demande au CNR (fiche à remplir obligatoire). Envoyez courriel à l’adresse : cnrmyrma.bichat@cnrmyrma.fr